LABORATORIO DI ESPRESSIONE DI PROTEINE – IC CATANIA

Il laboratorio di Espressione di Proteine contiene tutte le strumentazioni necessarie per la produzione di proteine eterologhe da E. Coli o altri batteri opportunamente ingegnerizzati attraverso le comuni tecniche di biologia molecolare. La crescita dei batteri in piastre di agar-agar o in sospensione viene condotta a temperatura controllata e in condizioni di agitazione opportune (MaxQ 6000, Thermo Scientific). L’isolamento del batteri dalle colture in sospensione, nonché la rimozione dei residui insolubili cellulari in seguito alla loro lisi, viene realizzata mediante centrifughe refrigerate per grandi (SL-40R, Thermo Scientific) e piccoli (MicroCL-21R, Thermo Scientific) volumi. Le proteine sovra-espresse possono essere purificate mediante separazioni cromatografiche di vario genere (colonne SEC e a scambio ionico con differenti capacità di caricamento e di risoluzione) con l’ausilio di una sistema di purificazione FPLC automatizzato (Biologic Duo Flow, BioRad) opportunamente refrigerato a 4°C. Analisi elettroforetica su gel di poliacrilammide (Native- e SDS-PAGE), Western Blot e saggi ELISA completano la caratterizzazione delle proteine sovra-espresse nonché l’analisi di quelle endogene da cellule eucariotiche coltivate nell’attiguo laboratorio di Biologia Cellulare. La presenza di cappe ad uso chimico (BelAir56, Momoline) e biologico (Maxisafe 2020, Thermo Scientific) assicurano che l’utilizzo dei reagenti chimici e dei campioni biologici avvenga nel rispetto delle vigenti norme di sicurezza.

N. 1 Cromatografia Liquida Veloce di Proteine (Biologic Duo Flow, BioRad)
N.1 Cappa Chimica
N. 1 Cappa a Flusso Laminare
N. 1 Incubatore a CO2 per batteri

Nome e Cognome: FRANCESCO BELLIA 

Sede: IC-CNR  Via Paolo Gaifami 9, 95126 Catania (CT)

Tel:  +39 0957338-448

Mail : francesco.belliaATcnr.it

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